为什么要构建表达载体? 如何构建表达载体

为什么要构建表达载体? 如何构建表达载体

1、得到大量的DNA , 虽然PCR也可以 , 但PCR扩增有出错率、但你每做一次常规的PCR,而且每次都要重新提DNA和RNA才行,而且,PCR反应的试剂盒又不便宜,用PCR来制备大量DNA有点得不偿失 。尽管构建克隆载体也存在操作复杂(相对于PCR) , 成功率不是极高,而且还要筛选,但一旦你重组成功并转入了大肠杆菌,你就可以保存了,你想什么时候用,摇个菌,就可以制备到大量的DNA 。【为什么要构建表达载体? 如何构建表达载体】

2、测序需要 。你想转表达,你首先得确定你扩增的目的片段是不是你要的,不要以为你设计了个特异性引物,然后跟你mark的长度就可以确定了,这也只是推测 , 在科学上不严谨 。扩增出的基因片段保险起见或者经费允许,要拿去测序 , 而一般送测的序列都是构建到载体上的序列,克隆载体上一般也都带有测序引物 , 已确定这就是你要的那条序列 。你要写论文必须要给人真凭实据 。

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