1、意思不同
at play意思：游玩;游戏;玩耍
on play意思：游戏;玩耍
2、用法不同
at play用法：用于一般现在时时,宾语前不加冠词,表示游玩;游戏;玩耍 。
【play】例句：I watch the boys at play. 我照看孩子们玩耍 。
on play用法：基本意思是指为了消遣和娱乐而进行身体的或精神的活动,即“玩,玩耍”,也可指与某人进行一场比赛 。
例句：The company put on a play about the homeless.这家剧团上演了一出讲述无家可归者的戏 。
3、侧重点不同
at play侧重点：只限用于儿童，不可以用在成人身上 。
on play侧重点：可以用在儿童或成人身上 。
