【rpa技术原理 RPA技术】rpa技术原理:
rpa全称为:Recombinase Polymerase Amplification,即重组酶聚合酶扩增 。重组酶与引物结合形成的蛋白-DNA复合物,能在双链DNA中寻找同源序列 。一旦引物定位了同源序列,就会发生链交换反应形成并启动DNA合成,对模板上的目标区域进行指数式扩增 。被替换的DNA链与SSB结合 , 防止进一步替换 。在这个体系中,由两个相对的引物起始一个合成事件 。整个过程进行得非常快,一般可在十分钟之内获得可检出水平的扩增产物 。
重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA),被称为是可以替代PCR的核酸检测技术 。RPA技术主要依赖于三种酶:能结合单链核酸(寡核苷酸引物)的重组酶、单链DNA结合蛋白(SSB)和链置换DNA聚合酶 。这三种酶的混合物在常温下也有活性,最佳反应温度在37摄氏度左右 。