食用菌生产中的灭菌和消毒是有本质区别的,灭菌是杀死杂菌及其芽孢的过程,消毒是杀死食用菌表面部分病原微生物的过程 。本文介绍一下食用菌母种培养基的灭菌方法与步骤 , 供参考 。
一、食用菌母种培养基的灭菌方法
在食用菌母种培养基制作中常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法,它是最常用而且灭菌最彻底的一种方法 。具体方法步骤及注意事项如下:
1、选锅、加水选用手提式高压蒸汽灭菌锅,向灭菌锅内加水至水位标记高度 。注意:水不可过多也不可过少,过少易烧干:过多棉塞易受潮,引起杂菌污染 。
2、装入培养基把培养基有序竖直排放人灭菌锅内,留开通气孔 , 并保证蒸汽流通 。试管口和棉塞不能直接接触锅壁,上面要盖2层报纸或1层防水油纸 , 防止锅盖下面的冷凝水打湿棉塞 。
最后均匀拧紧锅盖上的螺丝,勿使漏气 。
3、加热灭菌将装入培养基的灭菌锅放置在2-3千瓦的电炉上进行加热,当压力升至0.05兆帕时,打开放气阀缓慢放气,让压力降至零,再放气10-15分钟,当有大量热蒸汽排出时 , 关闭放气阀升压灭菌 。
当压力升至0.11-0.12兆帕时,开始计时,并调节火力大?。贾瘴炙柩沽?0分钟 。
4、停止加热,缓慢减压在0.11-0.12兆帕压力下.灭菌30分钟后,停止加温 , 待压力自然下降到0时打开放气阀,缓慢排出残留蒸汽;然后打开锅盖 , 待热蒸汽冷却片刻后 , 取出灭菌物品 。
灭菌完后,若连续使用 , 应注意补足水分后再用 。若暂时不用 , 应排出锅内剩余水分,清理干净,下次备用 。
二、食用菌接种场所的消毒方法
首先将接种箱、接种室或者接种帐的卫生打扫干净;然后放人所有用具及母种培养基,用甲醛和高锰酸钾熏蒸消毒 。药品用量为每立方米甲醛10毫升 , 高锰酸钾5克 。
熏蒸后的接种箱、接种室或者接种帐还可用紫外线辅助杀菌,一般10立方米的空间 , 用30瓦的紫外线灯照射30分钟,待臭氧散去,即可开始接种 。
若采用超净工作台接种 , 首先要将超净工作台用清洁的水和干净的抹布擦洗干净,然后再用75%的酒精擦拭 , 放人接种用具和母种培养基,开机吹无菌风30分钟 。
三、食用菌菌种消毒后的培养
通过加温、通风、洒水、遮光等方法 , 保持培养室(箱)温度20℃-24℃;空气相对湿度在60%左右;暗光;空气新鲜 , 促使菌丝健壮生长 。经2-3天,即可在接种块上萌发出大量菌丝,经7-10天即可长满培养基斜面 。
在培养期间每隔2-3天检查一次菌丝生长情况,若发现有杂菌污染或生长不正常的试管,立即挑出并淘汰 。
【食用菌母种培养基的灭菌方法与步骤 食用菌母种培养基的灭菌方法与步骤】长满的菌种可用于进一步扩繁,若暂时不用可放置在20℃-40℃的冰箱中冷藏备用 。